ELISA

Du Test ELISA est un examen de laboratoire médical qui entraîne une réaction dite antigène-anticorps. Différents antigènes jouant un rôle en médecine humaine ou vétérinaire peuvent être testés. En Allemagne, seuls les instituts de laboratoire accrédités sont chargés de réaliser le test.

Qu'est-ce que la procédure?

Le test ELISA est l'une des méthodes dites immunologiques des tests de laboratoire médical. La procédure de test peut être utilisée pour détecter des molécules de protéines dans une grande variété de fluides corporels.

ELISA est l'abréviation de Dosage immuno-enzymatique. C'est donc un nom de langue anglaise, mais il s'est imposé dans l'usage médical allemand.

Le test ELISA est l'une des méthodes dites immunologiques des tests de laboratoire médical. La procédure de test peut être utilisée pour détecter des molécules de protéines dans une grande variété de fluides corporels. La détection de ces molécules permet à son tour de tirer des conclusions sur certaines maladies ou tableaux cliniques, c'est pourquoi les médecins font également dépendre leur diagnostic du résultat d'un tel test ELISA. La procédure de test est donc très importante dans la pratique clinique quotidienne, ambulatoire ou hospitalière.

Les fluides corporels correspondants, par exemple le sang total ou les fluides des articulations, sont envoyés directement au laboratoire après avoir été prélevés sur le patient. Les échantillons sont généralement très urgents, car le matériel natif est considéré comme sensible et doit être examiné dès que possible. Les échantillons dits superposés peuvent conduire à des résultats faux négatifs car les protéines pathologiques à détecter ont entre-temps été réduites ou complètement décomposées. La prétendue pré-analyse joue un rôle important dans l'ELISA; les résultats suspects ou négatifs doivent être répétés à nouveau en cas de symptômes cliniques.

Fonction, effet et objectifs

Les tubes à essai et les plaques dites de microtitration sont essentiels pour un test correct dans un laboratoire médical accrédité. Ces plaques à fines empreintes semi-concaves sont en plastique spécial et sont chacune revêtues d'un anticorps très spécifique.

Si l'antigène à détecter est présent dans un fluide corporel à examiner, une réaction antigène-anticorps spécifique se produit selon le principe dit de verrouillage et de clé. Le personnel du laboratoire peut entrer le matériau de l'échantillon dans les plaques soit manuellement à l'aide de pipettes, soit de manière entièrement automatique. Dans les instituts de laboratoire médical modernes, seuls des systèmes entièrement automatisés sont utilisés pour effectuer des diagnostics ELISA.

Cependant, ceux-ci doivent être surveillés par du personnel qualifié, des assistants de laboratoire médico-techniques. Le soi-disant contrôle de qualité interne et externe relève également de la responsabilité du personnel du laboratoire, supérieur au personnel médical pour la médecine de laboratoire, l'épidémiologie des infections et la microbiologie. Après la première tentative, c'est-à-dire après que le matériau a été pipeté sur les plaques, les antigènes spécifiques de l'échantillon, s'ils sont présents, se sont déjà liés aux anticorps sur la plaque en plastique.

Ceci est suivi d'un cycle de lavage avec une solution saline physiologique afin d'éliminer les facteurs perturbateurs tels que les antigènes ou les protéines indésirables du lot. Cette étape est très importante pour éviter les fausses réactions positives. Un résultat supposément positif mal interprété par le laboratoire peut dans certaines circonstances avoir des conséquences fatales pour un patient. Dans la deuxième étape de l'enquête, un autre anticorps, qui est lié à une enzyme, est ajouté. Cet anticorps marqué se lie également à l'antigène.

Dans une troisième et dernière étape, un colorant spécial est ajouté en une quantité définie, qui est plus ou moins décomposée par les résidus enzymatiques restants. Seule cette enzyme peut être décomposée qui n'a pas été précédemment liée à l'antigène avec l'anticorps. L'enzyme libre est capable de cliver le colorant ajouté. La quantité exacte de colorant fractionné peut être déterminée avec une autre méthode de laboratoire médical, appelée photométrie. Cela permet de tirer une conclusion exacte sur la présence et la quantité d'antigène dans un échantillon.

Le test ELISA n'est pas seulement utilisé pour le diagnostic initial ou pour corroborer les diagnostics suspects de certaines maladies et tableaux cliniques, mais aussi pour suivre leur évolution. Si la concentration d'antigène dans le test diminue au cours du traitement, la thérapie est considérée comme réussie.

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Risques, effets secondaires et dangers

Le test ELISA est particulièrement informatif grâce à la détection de structures antigéniques dans les fluides corporels. Le test permet une déclaration dite qualitative, mais aussi semi-quantitative et quantitative sur la présence présumée de certains antigènes dans les fluides corporels.

Le sang total ne peut pas être utilisé pour l'examen, seulement le sérum sanguin. Un test direct sur le patient, par exemple à partir du sang capillaire du bout du doigt, n'est donc pas possible à ce jour, comme pour certains autres tests sérologiques. En médecine humaine, le test ELISA est principalement utilisé pour détecter les antigènes dans les infections bactériennes, virales ou fongiques. De plus, tous les résultats positifs de la sérologie de l'hépatite sont à nouveau vérifiés avec un test ELISA en standard.

Certaines hormones, telles que l'hormone de grossesse HCG, peuvent également être déterminées avec le test ELISA. Si certaines complications surviennent pendant la grossesse, une connaissance précise de la concentration de l'hormone de grossesse dans le sang est très utile sur les plans diagnostique et thérapeutique. Un autre domaine d'indication pour le test est la détection de ce que l'on appelle les paraprotéines dans l'urine, telles qu'elles apparaissent, par exemple, dans diverses maladies tumorales telles que le myélome multiple.

Le test ELISA est encore effectué dans de nombreux instituts de laboratoire aujourd'hui, mais est considéré comme obsolète par les experts. La réaction immunitaire enzymatique dans le test ELISA a été de plus en plus remplacée ces dernières années par des anticorps radiomarqués qui fournissent des résultats quantitatifs encore meilleurs. Ces tests sont également connus sous le nom de RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. D'autres développements spécifiques de l'ELISA sont des méthodes de chimie de la lumière telles que la luminescence ou la fluorescence.